ОДНОСТАДІЙНЕ ОЧИЩЕННЯ МОЛЕКУЛЯРНОГО ШАПЕРОНУ GroEL МЕТОДОМ АФІННОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ НА ОСНОВІ ДЕНАТУРОВАНОГО ПЕПСИНУ

  • Н. Марченко
  • В. Марченков
  • А. Кайшева
  • І. Кашпаров
  • Н. Котова
  • П. Каліман
  • Г. Семісотнов
Ключові слова: білок - білкові взаємодії, шаперони, GroEL, афінна хроматографія

Анотація

GroEL (олігомірний білок теплового шоку клітин Escherіchіa colі) є представником групи молекулярних шаперонів, що здатні запобігати агрегації денатурованих конформаційних станів білкових молекул шляхом взаємодії з ними. У представленій роботі продемонстровано можливість швидкого і високоефективного очищення GroEL на хроматографічному носії (сефарозі) з ковалентно пришитим ненативним пепсином. Представлено умови, що дозволяють одержати високоочищений нативний GroEL (за даними SDS-електрофорезу в поліакриламідному гелі, флуоресцентної спектроскопії й АТФ-азної активності) із клітинного лізату в одну стадію очищення. Метод афінної хроматографії може бути використаний як для препаративного виділення GroEL і подібних йому шаперонів із різних типів клітин, так і для експрес-аналізу змісту шаперонів у клітинах після впливу на них різноманітних стресів або патогенних факторів.

Завантаження

##plugins.generic.usageStats.noStats##
Опубліковано
2005-12-22
Цитовано
Як цитувати
Марченко, Н., Марченков, В., Кайшева, А., Кашпаров, І., Котова, Н., Каліман, П., & Семісотнов, Г. (2005). ОДНОСТАДІЙНЕ ОЧИЩЕННЯ МОЛЕКУЛЯРНОГО ШАПЕРОНУ GroEL МЕТОДОМ АФІННОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ НА ОСНОВІ ДЕНАТУРОВАНОГО ПЕПСИНУ. Вісник Харківського національного університету імені В. Н. Каразіна. Серія «Біологія», 1(709), 48-55. вилучено із https://periodicals.karazin.ua/biology/article/view/158
Розділ
БІОХІМІЯ