Оцінка мітохондріального потенціалу ізольованих гепатоцитів при зміну окисного статусу
Анотація
Методом флуоресцентних зондів оцінювали зміни трансмембранного потенціалу мітохондрій одиночних клітин у відповідь на дію екзогенних окислювачів. За допомогою мітохондріального зонда Jс-1, визнаного в даний час серед ліпофільних катіонних барвників найбільш специфічним в оцінці ΔΨm живих клітин, було показано, що під впливом Н2О2 і трет-бутілгідропероксіда (ТБГП) в умовах тривалої інкубації (протягом 3 годин) відбувається падіння трансмембранного потенціалу мітохондрій, яке не відміняється під впливом дітіотрейтола.Зростання інтенсивності флуоресценції агрегатної форми барвника в умовах стимуляції клітин адреналіном (10-6м) свідчило про підвищення трансмембранного потенціалу мітохондрій. Динаміка флуоресцентного відповіді на гормональний сигнал зберігалася на тлі короткострокового впливу пероксиду водню, проте при використанні в якості прооксідантом ТБГП характер флуоресцентних змін був іншим.Це дозволяє говорити про відмінності в механізмі впливу даних сполук на мітохондріальні процеси і особливості антиоксидантної захисту клітини щодо прооксидантів різної природи. Дослідження є актуальними, враховуючи сучасні уявлення про ключову роль мітохондрій у біоенергетиці клітини, в регуляторних, сигнальних і патофізіологічних процесах, так як Δψm може служити характеристикою функціонального стану мітохондрій і клітини в цілому.
Завантаження
Посилання
Freedman J.C., Novak T.S. Membrane potentials associated with Ca-induced K conductance in human
red blood cells: studies with a fluorescent oxonol dye, WW 781//J Membr Biol. -1983. 72, 59-74
Gross D., Loew L.M., Webb W.W. Optical imaging of cell membrane potential changes induced by
applied electric fields//Biophys J.1986. 50. 339-348
Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран./ Ю.А. Владимиров, Г.Е.
Добрецов – М.: Наука, 1980. - 318 с.
В.П. Скулачев. Явления запрограммированной смерти. Митохондрии, клетки и органы: роль
активных форм кислорода // Соросовский образовательный журнал. 2001. № 6. С.4-10.
Ю.А. Владимиров. Свободные радикалы в живых системах // Соросовский образовательный
журнал. 2000. № 6. С.13-19.
Johnson L.V., Walsh M.L., Chen L.B. Localization of mitochondria in living cells with rodamine
//Proc Natl Acad Sci USA. 1980. 77. 990.
Salvioli S., Ardizzoni A., Franceschi C., Cossarizza A. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a
reliable fluorescent probe to assess ΔΨ changes in intact cells: implication for studies on mitochondrial
functionality during apoptosis//FEBS Letters 1997. P. 77-82.
Diaz G., Setzu M.D., Zucca A., Isola R., Diana A., Murru R., Sogos V., Gremo F. Subcellular
heterogeneity of mitochondrial membrane potential: relationship with organelle distribution and
intercellular contacts in normal, hypoxic and apoptotic cells// Journal of Cell Science 1999.112, 1077-
Diaz G., Falchi A., Gremo F., Isola R., Andrea D. Homogeneous longitudinal pro¢les and synchronous
£uctuations of mitochondrial transmembrane potential//FEBS Letters 2000 475 218-224.
DiLisa F., Blank P.S., Colonna R., Gambassi G., Silverman H.S., Stern M.D., Hansford R.G.
Mitochondrial membrane potential in single living adult rat cardiac myocytes exposed to anoxia or
metabolic inhibition//Journal of physiology 1995. 486, 1. 1-13.
Канаева И.П., Карякин А.В., Аленичева Т.В., Бурмакова Г.А., Алимов Г.А. и др.
//Цитология.1975. Т.17. с 545-551.
Connern C.P., Halestrap A.P. Recruitment of mitochondrial cyclophilin to the mitochondrial inner
membrane under conditions of oxidative stress that enhance the opening of a calcium-sensitive nonspecific channel//Biochem. J. 1994. 302, 321-324.
Imberti R., Nieminen A.L., Herman B., Lemasters J.J. Mitochondrial and glycolytic dysfunction in
lethal injury to hepatocytes by t-butylhydroperoxide: protection by fructose, cyclosporin A and
trifluoperazine //J. Pharmacol. Exper. Ther. 1993.265, 392-400.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
