Оцінка трансмембранного потенціалу мітохондрій поодиноких гепатоцитів методом флуоресцентніх зондів

  • O. S. Filchack Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України
  • N. S. Kavok Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України
  • A. M. Stepanenko Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України
  • I. A. Borovoy Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України
Ключові слова: мітохондриальний трансмембранний потенціал, флуоресцентні зонди, гепатоцити

Анотація

В роботі у порівняльному аспекті досліджувалися характеристики зв’язування з гепатоцитами щурів новосинтезованих діалкільних (С4 и С18) похідних зонду JС-1. Було встановлено, що С4-похідні характеризуються подібною до JС-1 динамікою акумуляції в клітинах. У той же час загальна інтенсивність флуоресценції клітин, забарвлених С4-різновидами і співвідношення агрегатної та мономірної форм були нижче, ніж при забарвленні JС-1 тієї ж концентрації. При оцінюванні динаміки вигорання С4-похідного у режимі безперервного спостереження клітин була встановлена його більша у порівнянні з вихідною формою фоточутливість. Із всіх досліджуваних різновидів зонду інтенсивність флуоресценції клітин та співвідношення агрегатної та мономірної форм було набагато нижчим при забарвленні клітин довголанцюговим (С18) похідним тієї ж концентрації. При оцінюванні параметрів флуоресценції на тлі впливу протонофора FCCP чутливість до змін мітохондріального трансмембранного потенціалу спостерігалася тільки для вихідної форми барвника.

 

Завантаження

##plugins.generic.usageStats.noStats##

Біографії авторів

O. S. Filchack, Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України

вул. Леніна, 60, м. Харків, 61001, Україна

N. S. Kavok, Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України

вул. Леніна, 60, м. Харків, 61001, Україна

A. M. Stepanenko, Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України

вул. Леніна, 60, м. Харків, 61001, Україна

I. A. Borovoy, Інститут сцинтиляційних матеріалів НТК Інститут монокристалів НАН України

вул. Леніна, 60, м. Харків, 61001, Україна

Посилання

1. Новикова А.И., Макогон Н.В. мембранный потенциал как показатель гормонального эффекта у
животных разного возраста//Новые исследования по возрастной физиологии и биохимии,
природе гетерозиса и экологии животных. – Вестн. Харьк. ун-та, № 226. – Харьков: Вища школа.
Изд-во при Харьк. Ун-те, 1982. С.9-11.

2. Szewczyk A, Wojtczak L Mitochondria as a pharmacological target//Pharmacological reviews. 2002.
54: 101-127.

3. Lemasters JJ, Nieminen A-L Mitochondria in pathogenesis 2001.540

4. Cossarizza A, Ceccarelli D, Masini A (1996) Functional heterogeneity of an isolated mitochondrial
population revealed by cytofluorometric analysis at the single organelle level. Exp Cell Res 222:84-94.

5. Reers M, Smith TW, Chen L (1991) J-aggregate formation of a carbocyanine as a quantitative
fluorescent indicator of membrane potential. Biochemistry 30: 4480-4486.

6. Reers M, Smiley ST, Mottola- Hartshorn C, Chen A, Lin M, Chen L(1995) mitochondrial membrane
potential monitored by JC-1. Methods Enzymol 260: 406-417.

7. Reers M, Smith TW, Chen L (1991) J-aggregate formation of a carbocyanine as a quantitative
fluorescent indicator of membrane potential. Biochemistry 30: 4480-4486.

8. Smiley ST, Reers M, Mottola- Hartshorn C, Lin M, Chen A, Smith TW, Chen L (1991)Intracellular
heterogeneity in mitochondrial membrane potential revealed by a J-aggregate-forming lipophilic cation
JC-1. Proc Natl Acad Sci USA 88: 3671-3675.

9. Petit PX, O’Connor JE,Grunwald D, Brown SC (1990) Analysis of the membrane potential of rat- and
mouse-liver mitochondrial by flow cytometry and possible applications. Eur J Biochem 194: 389-397.

10. Cossarizza A, Ceccarelli D, Masini A (1996) Functional heterogeneity of an isolated mitochondrial
population revealed by cytofluorometric analysis at the single organelle level. Exp Cell Res 222:84-94.

11. Ankarcrona M, Dypbykt JM, Bonfoco E, Zhivotovsky B, Orrenius S, Lipto SA, Nicotera P (1995)
Glutamate-induced neuronal death: aSuccession of necrosis or apoptosis depending on mitochondrial
function.Neuron 15: 961-973.

12. Ankarcrona M, Dypbykt JM, Orrenius S, Nicotera P (1996) Calcineurin and mitochondrial function in
glutamate-induced neuronal cell death. FEBS Lett 394: 321-324.

13. Holtsberg FW, Steiner MR, Keller JN, Mark RJ, Mattson Mr, Steiner SM (1998) Lysophosphatidic
acid induces necrosis and apoptosis in Hippocampal neurons. J Neurochem 70: 66-76.

14. Cossarizza A, Savioli S, Franceschi C (1997) Analysis of mitochondrial membrane potential (Δψ) with
fluorescent probes. Postepy Biol Komorki 24: 575-585.
Опубліковано
2009-06-05
Цитовано
Як цитувати
Filchack, O. S., Kavok, N. S., Stepanenko, A. M., & Borovoy, I. A. (2009). Оцінка трансмембранного потенціалу мітохондрій поодиноких гепатоцитів методом флуоресцентніх зондів. Біофізичний вісник, 2(23), 140-147. вилучено із https://periodicals.karazin.ua/biophysvisnyk/article/view/17035
Розділ
Методи біофізичних досліджень