Спектральна поведінка амілоїдно-фарбових фарб у системах протеіну-ліпідів. III. Конго Червоні взаємодії з рідними білками
Ключові слова:
Конго червоний, гемоглобін, рібонуклєаза, цитохром с, альбумін, ліпосоми, білково-барвникові комплексиАнотація
Ряд так званих конформаційних захворювань (хвороби Паркінсона, Альцгеймера та Хантінгтона, цукровий діабет II типу, губчасті енцефалопатії, системний амілоїдоз) пов'язані з відкладенням у різних тканинах високовпорядкованих білкових агрегатів (амілоїдних фібрил), які вбивають клітини або перешкоджають їм функціонувати належним чином. Амілоїдні фібрили організовані в поперечну β-структуру з гвинтовим масивом β-листів, у яких довга вісь фібрили паралельна довгій осі спіралі і перпендикулярна βпрядам. Амілоїд можна ідентифікувати за допомогою діапазону методи: електронної та атомно-силової мікроскопії, дифракція фібрильної рентгенографії, флуоресценція тіофлавіну Т, двопроменезаломлення Конго-Червоного (CR) або спектрофотометричний аналіз. Однак терапевтичне виявлення амілоїдних фібрил за допомогою тесту на CR може перешкоджати здатності CR утворювати комплекси з природними білками. У цьому дослідженні ми досліджували зв'язування CR із низкою природних білків - гемоглобіном (Hb), цитохромом c (cyt c), рибонуклеазою A (RNase), сироватковим альбуміном людини (HSA). Взаємодія CR з Hb та cyt c супроводжувалося зменшенням поглинання та довгим хвильовим зсувом максимуму спектру у випадку Hb, вказуючи на те, що нативна структура білка містить сайти зв'язування для CR. Встановлено, що константа асоціації (Kb) і стехіометрія зв'язування (n), отримані в результаті аналізу даних в рамках моделі адсорбції Ленгмюра, становлять: Kb = (2,1 ± 0,3) × 105 M-1, n = 3,3 ± 0,5 для Hb і Kb = (6,0 ± 0,9) × 104 М-1, n = 1,0 ± 0,3 для cyt c. Наявність ліпідних везикул, що складаються з фосфатидилхоліну та кардіоліпіну, не впливала на взаємодію CR-Hb. Навпаки, константа асоціації для комплексоутворення CR-cyt c помітно зросла. Ця знахідка була інтерпретована з точки зору розгортання cyt c на межі розділу ліпід-вода у поєднанні з експозицією додаткових ділянок зв'язування CR на поверхні білка. Утворення комплексів CR з RNase та HSA супроводжувалось довгохвильовим зсувом максимумів поглинання. Криві зв'язування CR-HSA мають форму, подібну до Ленгмюра, тоді як ізотерми адсорбції CR-RNase трохи сигмоподібні, що вказує на кооперативний характер процесу зв'язування. Параметри зв’язування оцінювали як Kb = (1,3 ± 0,3) × 104 M-1, n = 2,3 ± 0,5 для HAS та Kb = (3,4 ± 0,3) × 104 M-1, n = 0,6 ± 0,1 та параметр Hill = 1,1 ± 0,2 для РНКази.
Завантажити
Завантаження
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
