Ефекти гідроген пероксиду на основні кінетичні параметри гідролізу АТР уабаїнчутливою NA+, K+-АТР-азою сперматозоїдів інфертильних чоловіків
DOI:
https://doi.org/10.26565/2075-3810-2017-38-05Ключові слова:
Na, K -ATР-аза, інгібування, кінетичний аналіз, сперматозоїди, інфертильність у чоловіківАнотація
Актуальність. Na+,K+-ATР-аза відіграє вирішальну роль у фізіології сперматозоїдів та підтриманні їх фертилізаційної здатності. Na+,K+-ATP-аза є однією з мішеней для активних форм оксигену. Гіперпродукція активних форм оксигену може пошкодити клітини сперматозоїдів і вважається одним із механізмів чоловічого непліддя.
Мета роботи. Оцінити вплив H2O2 на основні кінетичні параметри гідролізу АТР уабаїнчутливою Na+,K+-АТР-азою сперматозоїдів фертильних (нормозооспермія) та інфертильних чоловіків (астенозооспермія).
Матеріали і методи. Активність Na+,K+-АТР-ази визначали спектрофотометрично за утворенням Рі. Концентраційні залежності лінеаризовано в координатах Лайнуівера-Берка.
Результати. Продемонстровано ефективний інгібуючий вплив H2O2 на уабаїнчутливу Na+,K+-АТР-азну активність сперматозоїдів фертильних та інфертильних чоловіків. У зв’язку з інгібуючим ефектом H2O2 було досліджено вплив цього ефектора на основні кінетичні параметри гідролізу АТР за участю Na+,K+-АТР-ази. У всьому діапазоні досліджуваних концентрацій АТР активність Na+,K+-ATР-ази сперматозоїдів плідних та неплідних чоловіків знижена за присутності H2O2 в середовищі інкубації. Проте, оптимальна активність Na+,K+-АТР-ази сперматозоїдів чоловіків з нормо- та астенозооспермією спостерігається за наявності 5 мМ АТР в інкубаційному середовищі. Шляхом лінеаризації отриманих даних у координатах Лайнуівера-Берка визначено основні кінетичні параметри Na+,K+-активованого, Mg2+-залежного гідролізу АТР в сперматозоїдах фертильних та інфертильних чоловіків. За дії H2O2 константа спорідненості Na+,K+-ATР-ази до АТР в сперматозоїдах чоловіків з нормо- і астенозооспермією зростає в декілька разів. Початкова максимальна швидкість гідролізу АТР суттєво знижується лише в сперматозоїдах фертильних чоловіків з нормозооспермією.
Висновки. За умов H2O2-індукованого оксидативного стресу пригнічення активності уабаїнчутливої Na+,K+-АТР-ази в сперматозоїдах чоловіків відбувається за рахунок зниження спорідненості ензиму до субстрату та зниження числа обертів ензиму (лише для сперматозоїдів фертильних чоловіків).
Завантажити
Завантаження
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
