ОДНОСТАДІЙНЕ ОЧИЩЕННЯ МОЛЕКУЛЯРНОГО ШАПЕРОНУ GroEL МЕТОДОМ АФІННОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ НА ОСНОВІ ДЕНАТУРОВАНОГО ПЕПСИНУ
Ключові слова:
білок - білкові взаємодії, шаперони, GroEL, афінна хроматографіяАнотація
GroEL (олігомірний білок теплового шоку клітин Escherіchіa colі) є представником групи молекулярних шаперонів, що здатні запобігати агрегації денатурованих конформаційних станів білкових молекул шляхом взаємодії з ними. У представленій роботі продемонстровано можливість швидкого і високоефективного очищення GroEL на хроматографічному носії (сефарозі) з ковалентно пришитим ненативним пепсином. Представлено умови, що дозволяють одержати високоочищений нативний GroEL (за даними SDS-електрофорезу в поліакриламідному гелі, флуоресцентної спектроскопії й АТФ-азної активності) із клітинного лізату в одну стадію очищення. Метод афінної хроматографії може бути використаний як для препаративного виділення GroEL і подібних йому шаперонів із різних типів клітин, так і для експрес-аналізу змісту шаперонів у клітинах після впливу на них різноманітних стресів або патогенних факторів.
Завантаження
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої її публікації на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License 4.0 International (CC BY 4.0), яка дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи.
Автори мають право укладати додаткові невиключні угоди щодо поширення опублікованої версії роботи (наприклад, розміщення в інституційних репозитаріях або публікація у збірниках) за умови зазначення її первинної публікації в цьому журналі.
